يتضمن كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي فصل المركبات عن بعضها استناداً الى الاختلاف في الحجم والوزن الجزيئي عند إمرارها من خلال العمود الحاوي على حبيبات ذات مسامية معينة منتفخة متراصة (محبة للماء) تدعى الهلام (جيل) Gel مثل هلام الديكستران Dextran ( السيفاديكس Sephadex أو الأكاروز Agarose) والتي هي عبارة عن مشتقات لمتعدد السكريات أو يمكن استخدام هلام بايوجيـل Boi-gel الذي هو مشتقات متعدد أكرايل أميد Polyacrylamide وتحضر جميعاً بدرجات مختلفة من المسامية. فالجزيئات الكبيرة لا تستطيع اختراق ثقوب حبيبات الهلام المنتفخة وإنما تمر من خارج الحبيبات فتخرج من العمود مع السائل الراشح (الروغان) Elute أولاً حيث يمكن فصلها وجمعها بوساطة جهاز جامع الأجزاء التلقائي Fractions Collector ويجمع بشكل أنابيب صغيرة ومتسلسلة، اما الجزيئات الصغيرة فأنها تخترق حبيبات الهلام فتخرج من العمود مع السائل المترشح ثانياً الشكل (14-13). وبهذه الطريقة يمكن فصل مزيج من الببتيدات أو البروتينات استناداً الى الاختلاف في الحجم والوزن الجزيئي  فضلاً عن. ذلك فأن حبيبات الترشيح الهلامي تعمل غربالاً جزيئياً يمكن من خلاله فصل البروتينات عن الأملاح مثل كبريتات الأمونيوم المتحدة بها بفترات زمنية متلاحقة إذ يعتبر الترشيح الهلامي احد الطرائق المهمة المستعملة كثيراً لفصل البروتينات عن الأملاح Desalting

الشكل (14-13) يلاحظ في تقنية كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي ان مزيج من البروتينات الصغيرة تمر من داخل حبيبات الهلام بينما البروتينات الكبيرة لا تستطيع ان تمر من الداخل لذلك سوف تمر من محيط الحبيبات وتجتاز بشكل أسرع من البروتينات الصغيرة بحيث يكون ترتيب النزول خلال حجم

الروغان في البدء الكبيرة ثم متوسطة الحجم ثم الصغيرة.

استخدامات كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي

1- فصل المركبات ذات الحجوم والأوزان الجزيئية المختلفة.

2- تنقية المركبات.

3 عزل المركبات وتقدير كمياتها في المزيج.

4- إيجاد الأوزان الجزيئية للمركبات المفصولة بالمقارنة مع مركبات ذات أوزان جزيئية معروفة من

خلال رسم الأوزان الجزيئية المعروفة مقابل لوغاريتم حجوم روغانها في عمود الفصل.

وفي ما يأتي الجدول ( 3-13) يوضح أنواع الهلام المستخدم في هذه التقنية ومدى الوزن الجزيئي الذي يمكن فصله:

*مدى التجزئة Exclusion limit: يعرف بأنه الوزن الجزيئي للمركب الذي لا يدخل في الثقوب علـى سطح حبيبات الهلام.

**إن الأرقام بعد الحرف G  (.........15,10)   تمثل كمية الماء الممتص حين وضع حبيبات الهلام الجافة في الماء ويقاس بوحدة (mL/g ) وإن 10- G يمتلك أعلى كمية من التأصر الجسري Cross linking للديكستران.